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《糧油檢驗 糧食及其制品中維生素B快速檢測》征求意見

儀表網 2023-05-23
由國家糧食和物資儲備局組織起草的《糧油檢驗 糧食及其制品中維生素B快速檢測》標準已形成征求意見稿,現向社會公開征求意見,截止日期為2023年7月19日。意見反饋郵箱:tc270sc1@ags.ac.cn。
 
  維生素 B 是維持人體正常機能與代謝活動不可或缺的水溶性維生素,可以促進生長發育幫助維持心臟、神經系統功能,維持消化系統及皮膚的健康,缺乏B 族維生素,會導致代謝障礙,人體易出現怠滯和血壓升高等問題。維生素 B3(煙酸)、維生素 B5(泛酸)、維生素 B7(生物素)、維生素 B9(葉酸)存在于糧食及其制品中,而植物性食品中幾乎不含維生素 B12。為達到理想的平衡膳食模式,營養強化米粉、營養強化小麥粉作為天然食品的補充滿足了不同人群的需要。我國相繼出臺了 GB 14880-2012《食品營養強化劑使用標準》、GB 31601-2015《孕婦及乳母營養補充食品》等對糧食及其制品營養強化允許添加量進行了限制;GB 28050-2011《預包裝食品營養標簽通則》、GB 13432-2013《食品安全國家標準 預包裝特殊膳食用食品標簽》等標準對含量標示量等進行了規定。
 
  維生素 B3、B5、B7、B9、B12 含量檢測經典方法為微生物法,也可采用液相色譜或液質聯用等。微生物測定活性維生素 B 結果準確度高,但操作步驟繁雜,檢測實驗需要進行菌株的活化、轉種、培養、測試菌液制備和培養基配制等人工操作步驟,復雜繁瑣并對檢測技術人員的專業技能要求較高,這也造成了在實際操作中,使用傳統微生物法檢測維生素 B 族結果不穩定,實驗室間結果可比性較差。液相色譜法測定水溶性維生素具有特異性強的優勢,但需要昂貴的檢測儀器設備和耗材,樣品中基質對結果會產生干擾,且樣品處理復雜,只能根據結構檢測維生素的含量,不能準確檢測活性維生素的含量。與此同時,食品行業日常生產質控、食品安全監管部門開展食品安全監督檢驗、第三方檢測機構為社會提供食品檢驗技術服務,均需要更加操作簡便、經濟高效、結果準確、適用性廣的檢測方法,現有標準方法尚不能完全滿足。
 
  本標準在微生物法的基礎上,為改善微生物培養過程中一系列影響檢測技術性能的問題,針對現有的維生素 B3、B5、B7、B9、B12 快速定量方法進行研究,規范檢測方法標準,提高檢測效率和檢測結果準確性制定本行業標準,旨在建立科學規范的快速檢測定量方法,為準確評價糧食及其制品維生素 B 族含量和標簽標注成分的準確性,鼓勵糧食營養強化制品的生產和推廣,加強政府監管能力,保障人民群眾的身體健康。
 
  本文件按照GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第1部分:標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。
 
  本文件規定了糧食及其制品中維生素 B3(煙酸)、維生素 B5(泛酸)、維生素 B7(生物素)、維生素 B9(葉酸)、維生素 B12的快速檢測方法。
 
  本文件第一法適用于糧食及其制品中維生素 B3(煙酸)的快速檢測。本文件第二法適用于糧食及其制品中維生素 B5(泛酸)的快速檢測。本文件第三法適用于糧食及其制品中維生素 B7(生物素)的快速檢測。本文件第四法適用于糧食及其制品中維生素 B9(葉酸)的快速檢測。本文件第五法適用于糧食及其制品中強化維生素 B12的快速檢測,不適用于維生素 B12總量的快速檢測。
 
  原理:
 
  樣品經過提取和稀釋后與維生素B3檢測培養基一同加入包埋有植物乳植桿菌(Lactiplantibacillus plantarum)(ATCC 8014)的微孔中。植物乳植桿菌生長狀況取決于維生素B3的含量,直至培養液中的維生素B3被完全消耗。植物乳植桿菌的生長狀況(濁度)與維生素B3含量呈現對應關系,經酶標儀進行吸光度值測定并擬合標準工作曲線,計算出試樣中維生素B3含量。
 
  儀器和設備:
 
  1.天平:感量0.01g、0.0001g。
 
  2.高壓滅菌鍋。
 
  3.無菌操作臺。
 
  4.酶標儀:540nm 或630nm。
 
  5.恒溫培養箱:帶暗室,36 ℃±1 ℃。
 
  6.水浴鍋:95 ℃±1 ℃。
 
  7.粉碎機:錘式旋風磨,具有風門可調和自清理功能,以避免樣品殘留和出樣管堵塞。在粉碎樣品時,應避免磨膛發熱。
 
  8.渦旋混合器。
 
  9.離心機:轉速≥8000 r/min。
 
  10.pH 計:精度±0.01。
 
  11.微量可調單通道移液器及配套無菌吸頭:100μL~1000μL、20μL~200μL。
 
  12.無菌離心管:帶刻度,帶螺帽,50mL。
 
  13.無菌離心管:2.0mL。
 
  14.無菌注射器:10mL。
 
  15.無菌聚醚砜濾膜(PES):0.22μm。
 
  16.容量瓶:1000mL、100mL。
 
  17.燒杯:1000mL、100mL。
 
  質量控制:
 
  1.標準濃度 0.0 μg/100 mL 測定吸光值應小于標準濃度 0.4 μg/100 mL 測定吸光值,標準濃度 4.0 μg/100 mL 測定吸光值應大于 0.6,否則表明實驗失敗。
 
  2.標準曲線的相關系數不得低于 0.99。
 
  3.標準溶液濃度點和待測樣品稀釋液兩個微孔間測定的吸光度相對偏差不應大于 5%,舍去的標準曲線濃度點數量不得超過 1 個。
 
  4.當待測樣品液的吸光值小于標準濃度 0.4 μg/100 mL 測定吸光值或大于標準濃度 4.0 μg/100 mL測定吸光值時,需調整稀釋倍數重新檢測,使待測樣品液的吸光值落在標準曲線的定量范圍內。
 
  5.每個批號試劑盒應進行驗收試驗,選取帶標物證書的質控樣品測定值需在質控樣品賦值范圍內的批次產品方可使用;或考察添加濃度水平為 0.3 mg/100 g 時,回收率在 90%~110%容許范圍內的批次產品方可使用。
 
  精密度:
 
  在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的15%。
 
  其他:
 
  本方法定量限為0.1 mg/100g。
 
  更多詳情請見附件。
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