近日，由國家糧食和物資儲備局組織起草的《糧油檢驗 糧食中T-2 HT-2毒素的測定 膠體金快速定量法》行業標準已形成征求意見稿，現向社會公開征求意見，截止日期為2023年5月17日，意見反饋郵箱tc270sc1@ags.ac.cn。
 

　　T-2/HT-2 毒素是由鐮刀菌屬中茄病鐮刀菌(Fusarium solani)等真菌代謝產生一種單端孢霉素類化合物，主要污染小麥、大麥、玉米、大豆等谷物及其加工制品，對人類健康及畜牧業構成了較大危害。
 

　　食品中 T-2/HT-2 毒素檢測方法有高效液相色譜法，高效液相色譜-串聯質譜聯用法，這兩種方法的前處理復雜，儀器昂貴，無法滿足大批量食品樣品快速篩查的需求，因此，尋求一種快速，準確，有效的 T-2/HT-2 毒素快速檢測方法十分必要。
 

　　膠膠體金快速定量法是一種基于酶聯免疫法的基礎上結合單克隆抗體技術建立的新型檢測技術，在糧食真菌毒素檢測領域運用較為廣泛，在黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素和赭曲霉毒素 A 四種毒素上的檢測，已十分成熟。本標準項目利用膠體金免疫層析技術對糧食中 T-2/HT-2 毒素定量分析，可提高糧食樣品檢測、監測效率，降低成本，保護環境，保障糧食質量安全和人民群眾身體健康。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第 1 部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。參考GB/T 5491 糧食、油料檢驗 扦樣、分樣法；GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法；GB/T 27404 實驗室質量控制規范 食品理化檢測等規程內容編制。
 

　　本文件規定了T-2/HT-2毒素總量的膠體金快速定量檢測方法的原理、試劑、儀器設備及材料、樣品制備、樣品測定、結果描述和重復性。本文件適用于小麥、玉米等糧食及其制品中T-2/HT-2毒素的快速定量檢測。
 

　　原理：
 

　　試樣提取液中T-2/HT-2毒素與檢測條中的膠體金微粒發生呈色反應，顏色深淺與試樣中T-2/HT-2毒素含量相關。用讀數儀測定檢測條上檢測線和質控線顏色深淺，根據顏色深淺和讀數儀內置曲線自動計算出試樣中T-2/HT-2毒素含量。
 

　　儀器設備及材料：
 

　　1.粉碎機：可使試樣粉碎后全部通過 20 目篩。
 

　　2.天平：分度值 0.01 g。
 

　　3.漩渦振蕩器。
 

　　4.濾紙：采用 Whatman 2V(或等效)濾紙。
 

　　5.移液器：100 μL ～ 1000 μL、20 μL ～ 200 μL。
 

　　6.離心機：轉速不低于 4000 r/min。
 

　　7.ROSA T-2/HT-2 毒素膠體金快速定量檢測條 1)：需冷藏儲存，具體儲存條件參照使用說明；技術要求見附錄 A。
 

　　8.孵育器：可進行 45 ℃恒溫(控溫精度 ± 1 ℃)孵育。
 

　　9.讀數儀：可測定并顯示膠體金定量檢測條的測定結果。
 

　　樣品測定：
 

　　1.將膠體金檢測條(6.7)從冷藏狀態(2 ℃ ~ 8 ℃)取出放置至室溫。將孵育器(6.8)預熱至 45 ℃。將檢測條(6.7)平放在孵育器(6.8)凹槽中，打開加樣孔。
 

　　2.準確移取 300 μL 待測溶液(7.3)，加入檢測條加樣孔中，關閉加樣孔及孵育器(6.8)蓋。
 

　　3.孵育 10 min 后，取出檢測條(6.7)觀察 C 線(質控線)和 T 線(檢測線)的顯色情況。若出現下述情況，視為無效檢測。1) C線不出現；2) C線出現，但彌散或嚴重不均勻；3) C線出現，但T1或T2線彌散或嚴重不均勻。
 

　　4.選擇讀數儀(6.9)的 T2 檢測頻道，并設定為基質 00(MATRIX 00)，開始樣品測定，測定需在2 min 內完成，讀數儀(6.9)自動顯示樣品中 T-2/HT-2 毒素的含量。
 

　　若讀數儀顯示“ + 250ppb”，需移取 300 μL 待測溶液(7.3)于離心管中，加入 1.0 mL 稀釋緩沖液混勻后，按照 8.1 ～ 8.4 進行測定，其中基質設定為 01(MATRIX 01)。
 

　　結果表述：
 

　　試樣中T-2和HT-2毒素總含量由讀數儀自動計算并顯示，單位為微克每千克(μg/kg)。方法檢測限為5 μg/kg。
 

　　重復性：
 

　　在同一實驗室，由同一操作人員使用同一儀器，按照相同的測定方法，對同一被測試對象相互獨立進行測試獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值大于其算術平均值20%的情況不超過5%。
 

　　更多詳情請見附件。